生物实验：分离小鼠脾脏淋巴细胞

生物实验：分离小鼠脾脏淋巴细胞

脾脏是机体重要的免疫器官之一，脾脏中含有大量的淋巴细胞。在老鼠中，由于老鼠血液量少，故经常需要从老鼠脾脏中获取大量的淋巴细胞，主要是T/B细胞，用于体外免疫实验。

小鼠脾脏中各类细胞所占据的比例可参考一下图片或者参考资料。

颈椎脱臼法处死小鼠。解剖小鼠腹部。扒开内脏，可看到如图所示的长约3-4厘米呈长条状的深红色组织，即为脾脏；

将分离得到的脾脏组织浸泡在干净的PBS溶液中；

在一个培养皿中加入适量的PBS溶液，放一个细胞筛，将脾脏取出放于细胞筛中。取干净的注射器，用其按压处的末端对组织进行碾压。膜内细胞会慢慢游离出来，经过细胞筛之后，悬浮在培养皿溶液中；

洗一洗细胞筛，收集细胞筛外PBS，400g, 50ml离心管离心，15min；

去上清，加红细胞裂解液2ml，重悬。37度2min；

离心400g，15min，PBS 5ml洗一遍，离心400g，除去上清；

细胞培养基重悬5ml，除去其中不可溶的组织纤维，悬浮液取100ul细胞计数；

稀释细胞，培养或者铺板。